Dall'Ovocita alla Blastocisti: Un Viaggio nello Sviluppo Embrionale e la Valutazione della Qualità nella Fecondazione In Vitro

Nei trattamenti di fecondazione in vitro (FIV), sia che si tratti di FIV convenzionale che di ICSI, gli embrioni vengono coltivati in laboratorio per alcuni giorni. Questo processo è fondamentale per decidere quale(i) sarà(saranno) trasferito(i) nell'utero materno e quale(i) sarà(saranno) congelato(i) (vetrificato(i)). Per prendere questa decisione cruciale, la qualità degli embrioni deve essere valutata durante tutte le fasi dello sviluppo embrionale. A seconda del giorno di sviluppo dell'embrione, gli embriologi analizzano diverse caratteristiche per determinare la sua qualità e se sono suscettibili di essere impiantate per dare origine a una gravidanza.

Il processo di valutazione della qualità embrionale è un pilastro fondamentale nella medicina della riproduzione, poiché aiuta a selezionare gli embrioni con il più alto potenziale di impianto. È comune che si ottenga più di un embrione, quindi la sua classificazione aiuta a scegliere quali embrioni tra tutti quelli in coltura hanno più probabilità di impiantarsi e di dare origine a una gravidanza. Pertanto, per il trasferimento si terrà conto della classificazione degli embrioni, poiché gli embrioni di qualità più elevata saranno quelli introdotti nell'utero della madre. La valutazione richiede che si tenga conto delle diverse caratteristiche della loro morfologia, cioè della loro forma o aspetto, e dell'evoluzione nei giorni in cui rimangono in coltura.

L'Ovocita: La Base della Vita Embrionale

Per comprendere lo sviluppo embrionale, dall’ovocita alla blastocisti, è opportuno iniziare dalla definizione stessa di ovocita. Gli ovociti sono i gameti femminili, cellule aploidi, contenenti 23 cromosomi, prodotti in organi specializzati, le gonadi, mediante il processo di gametogenesi. L’ovocita è avvolto da una membrana detta OOLEMMA, ed è protetto da un ulteriore involucro proteico, la ZONA PELLUCIDA, di circa 15-20 micron di spessore. Avvolgono esteriormente l’ovocita le cellule del CUMULO OOFORO, che servono a nutrirlo e stimolarlo alla maturazione. L’ovocita (chiamato anche uovo o ovulo) è la cellula riproduttiva femminile. Tutte le donne nascono con una riserva di ovuli che si forma durante lo sviluppo fetale.

È importante notare che un follicolo e un ovulo non sono la stessa cosa, sebbene siano strettamente correlati. Ciascuno svolge un ruolo diverso nel processo riproduttivo. In ogni ciclo mestruale, diversi ovuli iniziano a maturare all'interno dei loro follicoli, anche se di solito solo uno viene rilasciato durante l'ovulazione, noto come follicolo dominante. Successivamente, il follicolo che ha rilasciato il suo ovulo diventa un corpo luteo, una struttura che produce progesterone ed estrogeni. Durante un trattamento di FIV, i farmaci utilizzati aiutano più ovuli a maturare contemporaneamente. Comprendere la differenza tra un follicolo e gli ovuli permette una migliore comprensione di come funziona il ciclo ovarico e come i trattamenti di fertilità sfruttano questo processo naturale. L'ovocita è il gamete femminile che unito a quello maschile, lo spermatozoo, dà origine all’embrione. Gli ovociti sono visibili solo al microscopio.

Il Percorso dello Sviluppo Embrionale in Laboratorio

Nei processi di FIV-ICSI, in cui la fecondazione degli ovociti viene effettuata in laboratorio, è importante valutare la qualità degli embrioni risultanti. Lo sviluppo degli embrioni viene seguito meticolosamente da esperti embriologi dalla fecondazione al momento del trasferimento nell’utero materno.

Per la valutazione, ci sono due opzioni principali:

• Rimuovere gli embrioni dall'incubatrice ogni giorno per alcuni minuti in modo che possano essere valutati al microscopio. Questa è l'alternativa tradizionale.
• Valutare gli embrioni utilizzando un sistema time-lapse, che permette di ottenere immagini ogni pochi minuti per valutare il loro completo sviluppo senza rimuoverli dall'incubatrice. Questo è un recente aggiunta ai laboratori di riproduzione assistita. L'uso di sistemi time-lapse permette all'embriologo di osservare l'intero sviluppo embrionale, non solo i momenti specifici in cui l'osservazione verrebbe effettuata al microscopio. Inoltre, evita le variazioni di temperatura e i gas che si producono quando gli embrioni vengono prelevati dall'incubatrice, riducendo lo stress e migliorando la vitalità degli embrioni.

Sia con la visualizzazione diretta al microscopio che con il sistema time-lapse, gli embrioni vengono valutati quasi ogni giorno fino al trasferimento o al congelamento. A seconda del giorno, gli embriologi dovranno prestare attenzione ad alcuni o altri aspetti della morfologia embrionale per poterli classificare. L’embrione è il primo stadio di sviluppo di un organismo che deriva dall’unione dei due gameti: femminile e maschile, ovocita e spermatozoo. Durante un ciclo di FIV, l’ovocita viene inseminato in laboratorio e l’embrione risultante viene conservato e monitorato per un periodo variabile dai due ai sei giorni, durante i quali si sviluppa in un organismo complesso pronto all’impianto nell’utero. Durante questo periodo, l’embrione subisce divisioni cellulari continue seguendo un ritmo specifico.

Giorno 1: Lo Zigote, la Prima Cellula

Il giorno dopo la fecondazione (Giorno 0) deve essere confermato se gli ovuli hanno fecondato con la comparsa del primo stadio embrionale: lo zigote. Dopo 24 ore dall’unione delle due cellule, al microscopio, è possibile vedere l’avvenuta fecondazione della cellula uovo che ha inglobato il corredo cromosomico dello spermatozoo, lo stadio di zigote. Si tratta di una singola cellula che non ha ancora iniziato a dividersi e nella quale si deve osservare quanto segue:

• Presenza di due pronuclei (NP): uno dall'ovulo e uno dallo sperma.
• Presenza di due globuli polari (PC): che indicano che dopo la fecondazione la meiosi dell'uovo è stata completata.
• Aspetto del citoplasma dello zigote: che deve essere uniforme e chiaro.

Per evitare interpretazioni errate, è importante effettuare questa valutazione tra 16 e 18 ore dopo l'inseminazione in vitro o la microiniezione. Se gli zigoti vengono osservati più tardi, i pronuclei potrebbero essere scomparsi, poiché questo evento è necessario per la prima divisione, che darà origine all'embrione a due cellule. L'esistenza dei due NP conferma che c'è stata una fecondazione. Se si osservano 1 o 3 pronuclei, l'embrione deve essere scartato, poiché ciò indica che la dotazione genetica dell'embrione non è adeguata. Il loro sviluppo nei prossimi giorni avviene nello stesso modo degli embrioni vitali, quindi è importante visualizzarli prima che si verifichi la fusione NP e non siamo in grado di distinguere gli embrioni vitali da quelli non vitali. L'Instituto Bernabeu classifica gli embrioni seguendo i criteri stabiliti dall’Associazione per lo Studio della Biologia Riproduttiva (ASEBIR) nel 2007 e aggiornati nel 2015. Il Giorno 1 è quando si analizza la fecondazione 16-22 ore dopo l’inseminazione e si considerano embrioni solo se presentano due pronuclei o due corpuscoli polari.

Giorno 2: L'Embrione a Quattro Cellule

Due giorni dopo l'inizio dello sviluppo, l'embrione ha già avuto due divisioni e sarà composto da 4 cellule, chiamate blastomeri. Osservati in seconda giornata, gli embrioni sono formati da 2 a 4 cellule (blastomeri). Sia il numero di blastomeri che il loro aspetto in questo momento saranno decisivi per la classificazione. L'osservazione di un numero di cellule inferiore o superiore a 4 è indicativa di uno sviluppo ritardato o accelerato. L’osservazione degli embrioni in questa fase dello sviluppo dovrebbe essere fatta tra le 44 e le 45 ore dopo l'inseminazione, prestando attenzione soprattutto ai seguenti aspetti:

• Numero e simmetria dei blastomeri: le 4 celle dovrebbero essere approssimativamente di dimensioni uguali.
• Numero di nuclei: ogni cellula deve avere un solo nucleo. Se ne hanno due, sarebbero binucleati, e se ne hanno più di due, sarebbero multinucleati. Se hanno più di un nucleo sono considerati anomali e associati ad errori di divisione cellulare.
• Tasso di frammentazione: i frammenti sono piccole tracce di citoplasma da una divisione anomala dei blastomeri. La quantità, la distribuzione e il volume dei frammenti sono importanti, in quanto possono compromettere lo sviluppo dell'embrione.
• Presenza di vacuoli: i vacuoli sono come "sacchettini" pieni di liquido. Se sono grandi o numerosi, possono avere un'influenza negativa sulla qualità degli embrioni.
• Forma e spessore della zona pellucida: devono essere rotondi e non troppo spessi o troppo sottili. Le alterazioni nella zona pellucida sono associate a bassi tassi di impianto, poiché sarà difficile per l'embrione staccarsi per impiantarsi.

Alcuni dei disturbi embrionali hanno una maggiore influenza sulla capacità dell'embrione di impiantarsi, quindi una o l'altra categoria di qualità sarà assegnata di conseguenza. Durante il Giorno 2 si studiano aspetti come il numero di cellule, il numero di nuclei di ogni cellula, la simmetria, il grado di frammentazione, la presenza di vacuoli e l’aspetto della zona pellucida. Nella maggior parte dei casi, si preferisce non controllare gli embrioni in questa giornata per evitare sollecitazioni ambientali, esposizioni alla luce e cambiamenti di temperatura e pH.

Giorno 3: L'Embrione a Otto Cellule

Per analizzare la qualità embrionale il terzo giorno, gli embrioni vengono valutati tra le 68 e le 69 ore dopo l'inseminazione. A questo punto vengono analizzati gli stessi parametri che sono stati considerati nel secondo giorno di sviluppo, così come il ritmo di divisione. In terza giornata (circa 72 ore post-fecondazione) un embrione sano ha in genere 7-10 cellule, con target ideale di 8 blastomeri. Gli embrioni della migliore qualità saranno quelli con 7-8 cellule, provenienti da embrioni a 4 cellule il giorno 2. Dal secondo giorno, è possibile vedere la moltiplicazione delle cellule che caratterizzano l’embrione. Al terzo giorno, è possibile distinguere nitidamente ben 10 cellule.

Gli embrioni possono essere trasferiti in questo momento dello sviluppo o conservati in incubatrice fino al 5 o 6° giorno per il trasferimento in fase di blastocisti. Inoltre, gli embrioni che non vengono trasferiti possono essere vitrificati in questo momento o al quinto o sesto giorno di sviluppo. Nota: una lieve variabilità nel numero di cellule è fisiologica. Durante il Giorno 3 si studiano aspetti come il numero di cellule, il numero di nuclei di ogni cellula, la simmetria, il grado di frammentazione, la presenza di vacuoli e l’aspetto della zona pellucida.

Giorno 4: La Morula, la Compattazione Cellulare

Dal quarto giorno di sviluppo si verifica il fenomeno della compattazione per formare una morula. È un processo attraverso il quale le cellule dell'embrione formano legami stretti tra loro e l'embrione assume l'aspetto di una mora. Diversamente dallo zigote, che è un embrione composto da un massimo di sedici cellule, la morula si caratterizza per una quantità di cellule variabile tra sedici e sessantaquattro.

Anche se alcuni embrioni possono mostrare segni di compattazione all'inizio del terzo giorno, la morula è di solito osservata tra le 90 e le 94 ore dopo la semina (quarto giorno di sviluppo). Questo momento fornisce poche informazioni sullo stato dell'embrione, dato che da quando tutte le sue cellule sono state compattate non è possibile contarle o osservare altre caratteristiche distintive. Anche così, i seguenti aspetti sono valutati negli embrioni in stadio di morula:

• Numero di cellule: l'embrione deve avere più di 8 cellule. Normalmente non è possibile contarli a causa della compattazione.
• Grado di compattazione: se la compattazione è in una fase iniziale, ci sono collegamenti tra le membrane cellulari, ma le cellule possono essere distinte l'una dall'altra; se la compattazione è avanzata, le cellule non possono più essere distinte. La compattazione deve essere completa, cioè deve interessare tutte le cellule dell'embrione. Se è parziale significa che alcune cellule sono state escluse ed è un segno di cattiva prognosi.
• Frammenti e vacuoli: se si osserva una di queste due strutture, l'embrione o parte di esso può essere degenerante.

L'embrione ottimale il giorno 4 è quello che soddisfa le seguenti caratteristiche: ha più di 8 cellule, viene compattato o compattato e la compattazione interessa l'intero volume dell'embrione.

Giorno 5 o 6: La Blastocisti, Ultima Fase in Laboratorio

Tra 114 e 118 ore (5° giorno) o 136-140 ore (6° giorno) post-inseminazione ci troviamo di fronte a una blastocisti, l'ultimo stadio dello sviluppo embrionale che può avvenire in laboratorio. La blastocisti è la fase di sviluppo embrionale che ha origine cinque o sei giorni dopo la fecondazione dell’ovocita da parte dello spermatozoo. La formazione della blastocisti è essenziale per l'impianto dell'embrione nell'utero, quindi la sua formazione in coltura è considerata di buona prognosi. Lo stadio di blastocisti è molto importante per la successiva fase di impianto nell’utero materno.

Questi embrioni hanno due strutture chiave nella loro morfologia:

• La massa della cellula interna (MCI): darà origine agli strati embrionali che daranno origine agli organi del bambino, ovvero si sviluppa nel feto stesso. Pertanto, la salute e la vitalità dell’ICM sono direttamente collegate allo sviluppo dell’embrione in un bambino sano.
• Il trofoectoderma o massa della cellula esterna: darà origine alla placenta e ad altre strutture fetali di supporto. Forma lo strato esterno della blastocisti ed è responsabile dell'impianto iniziale nella parete uterina. Pertanto, entrambe le parti sono ugualmente importanti per una gravidanza di successo, poiché ciascuna svolge funzioni indispensabili per il proseguimento di una gravidanza sana.

Entrambe le strutture si distinguono per l'aspetto del blastocele: la cavità centrale riempita di fluido. Tra la centesima e la centoventesima ora dalla fecondazione si verifica la blastulazione, una fase in cui le cellule si separano creando una cavità piena di liquido chiamata blastocele. La blastocisti ha inoltre peculiarità strutturali del tutto diverse dall’embrione dei giorni precedenti e si compone di due aree che ne indicano la qualità e la possibilità di impianto e gravidanza.

Il transfer in quinta giornata (blastocisti) è spesso indicato quando si desidera massimizzare la sincronizzazione con l’endometrio e/o selezionare gli embrioni che dimostrano miglior potenziale d’impianto in coltura prolungata. Le blastocisti (embrioni del 5° giorno) sono spesso preferite per il trasferimento nelle procedure di fecondazione in vitro perché hanno una maggiore probabilità di impiantarsi nell'utero rispetto agli embrioni trasferiti nelle fasi precedenti dello sviluppo. Questa preferenza è in parte dovuta al processo di selezione naturale; gli embrioni che raggiungono lo stadio di blastocisti sono generalmente più vitali e robusti. Tra il Giorno 5 e 6 dopo la fertilizzazione, gli embrioni concludono la propria trasformazione come blastocisti. In questa fase di sviluppo è possibile visualizzare e individuare alcune parti.

Categorie di Qualità Embrionale: Un Sistema di Valutazione Cruciale

Attualmente, gli embrioni sono classificati per categoria in base alla loro qualità morfocinetica. È importante indicare che la classificazione in queste 4 categorie viene decisa il giorno stesso del trasferimento. La classificazione degli embrioni è una tecnica utilizzata dagli specialisti della fertilità per valutare la qualità degli embrioni prodotti attraverso la fecondazione in vitro (IVF) prima che vengano trasferiti nell'utero. Il processo prevede l'esame degli embrioni al microscopio e l'assegnazione di gradi in base a determinati criteri, come il numero di cellule, l'uniformità della divisione cellulare e il grado di frammentazione (quanti pezzi di cellule morte o degenerate sono presenti).

Qualità degli Embrioni Precoci (Giorno 2 o Giorno 3)

I seguenti gradi di qualità sono assegnati agli embrioni il Giorno 2 o il Giorno 3 di sviluppo secondo i diversi parametri menzionati nelle sezioni precedenti:

• Categoria A o 1: embrioni di ottima qualità, con la massima capacità di impianto.
• Categoria B o 2: embrioni di buona qualità con elevata capacità di impianto.
• Categoria C o 3: embrioni di qualità intermedia, con una capacità di impianto media.
• Categoria D o 4: embrioni di scarsa qualità con bassa capacità di impianto.

Qualità delle Blastocisti: Il Sistema di Gardner

Sia gli embrioni del terzo giorno che le blastocisti possono essere classificati, ma in modo diverso, poiché anche la struttura embrionale è diversa in entrambi gli stadi. Per valutare le blastocisti, come abbiamo già visto, la consueta classificazione embrionale ha un numero e 2 lettere: il numero (da 1 a 5) indica il grado di espansione della blastocisti; la prima lettera (A, B, C o D), la qualità della massa cellulare interna; e la seconda (A, B, C o D), quella del trofoectoderma. Il sistema di classificazione Gardner degli embrioni è il sistema di classificazione degli embrioni più comunemente utilizzato. Così, le blastocisti con la migliore morfologia e la maggiore capacità di impianto sarebbero le 3AA. Il Dott. Jose Luis De Pablo, embriologo clinico senior, spiega che nella blastocisti si valutano due parti fondamentali: la massa cellulare interna, che darà origine all'embrione, e il trofoectoderma, uno strato di cellule che darà origine alla placenta. A seconda del numero di cellule, della compattazione della massa cellulare interna e della disposizione di tali cellule, verrà data la categoria finale della blastocisti.

Le categorie numeriche assegnate in base all'espansione sono le seguenti:

• Grado 1: blastocisti precoce (BP) in cui si comincia a vedere il blastocele.
• Grado 2: blastocisti cavitate (BC) in cui le diverse parti della blastocisti sono perfettamente visualizzate.
• Grado 3: blastocisti espansa (BE). La blastocisti è aumentata di dimensioni e la zona pellucida è sottile.
• Grado 4: la blastocisti inizia a schiudersi (hatching), cioè la blastocisti comincia ad emergere dalla zona pellucida.
• Grado 5: blastocisti completamente in hatching. La blastocisti è già uscita della zona pellucida.

Anche lo spessore della zona pellucida è importante. Deve diventare più sottile per consentire l'espansione della blastocisti e la sua uscita per l'impianto nell'endometrio. Una zona pellucida fine è legata a una buona qualità embrionale e a un'alta probabilità di impianto.

Per quanto riguarda la massa interna della cellula (MCI), le 4 categorie sarebbero le seguenti:

• Categoria A: numerose celle che formano una struttura compatta.
• Categoria B: numerose cellule non compattate.
• Categoria C: poche cellule.
• Categoria D: cellule con segni di degenerazione.

D'altra parte, il trofoectoderma deve avere un unico strato. Secondo lo stato delle sue cellule, è classificato come segue:

• Categoria A: omogenea, coesiva e multicellulare.
• Categoria B: omogeneo e con meno cellule.
• Categoria C: poche cellule.
• Categoria D: cellule con segni di degenerazione.

Nuova Catalogazione delle Blastocisti: L'Approccio ASEBIR

L'Associazione per lo Studio della Biologia della Riproduzione (ASEBIR) ha proposto una nuova classificazione embrionale che dà maggior peso alla morfologia del trofoectoderma rispetto a quella della massa cellulare interna. In essa la qualità è assegnata con una singola lettera (A, B, C o D) che comprende lo stato sia della massa cellulare interna (MCI) che del trofeoderma. Quindi, se la MCI è di qualità A e il trofoectoderma è di qualità B, la valutazione globale della blastocisti sarebbe B. Sia nella catalogazione convenzionale che in quella nuova, nel caso in cui gli embrioni siano portati a coltura lunga per il loro trasferimento in fase di blastocisti, sarà necessario tenere conto della classificazione in fase iniziale (giorni 2 e 4) così come quella presentata il giorno 5/6 per la sua valutazione globale. È anche importante tener conto del fatto che la valutazione degli embrioni è spesso molto soggettiva, per cui possono esserci variazioni tra i laboratori.

L'Importanza della Qualità Embrionale per la Gravidanza

Sebbene l’aspetto morfologico di un embrione sia il dato più affidabile sulla sua vitalità, ci sono molti altri fattori che influenzano la possibilità di una gravidanza riuscita. Quando si sceglie un embrione per il trasferimento, 5AA è l'embrione ottimale che mostra la massima qualità sia per lo stadio di sviluppo che per la composizione cellulare. Anche gli embrioni 5AB e 5BA hanno buone possibilità di successo nel trasferimento di embrioni. Idealmente, un grado di qualità di 3, 4 o 5 dovrebbe essere osservato su un embrione al 5° giorno, mentre i gradi 4 e 5 sono superiori nel loro modello di sviluppo. La massa cellulare interna e la classificazione del trofoectoderma di A e B sono indicatori affidabili della sopravvivenza dell'embrione dopo il trasferimento.

Secondo la ricerca clinica sul campo, le blastocisti utilizzate per il trasferimento di grado 3AA, 4AB, 4BA o superiore hanno in media un tasso di gravidanza clinica leggermente superiore al 60% (5AA è superiore rispetto a 4AB, ad esempio). Per gli embrioni classificati 4BB, 4AC, 3BB, 2AB e 2BA, il tasso di gravidanza è stato stimato intorno al 45-50%. Durante un ciclo di fecondazione in vitro, ai pazienti vengono spesso fornite le foto dei loro embrioni insieme a un punteggio di valutazione che può sembrare terribilmente tecnico. Il transfer in quinta giornata (blastocisti) è spesso indicato quando si desidera massimizzare la sincronizzazione con l’endometrio e/o selezionare gli embrioni che dimostrano miglior potenziale d’impianto in coltura prolungata. Il momento in cui l’embrione viene trasferito nell’utero varia infatti da caso a caso: il transfer potrà quindi essere di embrioni o di blastocisti.

Probabilità di gravidanza con 2 embrioni di grado A?Due embrioni di grado A hanno un'alta probabilità di essere impiantati, purché gli altri fattori coinvolti siano corretti (endometrio, trasferimento…). Si può concludere che il tasso di gravidanza di questi embrioni può superare il 70% quando le condizioni sono corrette.

Il giorno 3, qual è la qualità di un embrione 8 II?Corrisponderebbe ad un embrione di categoria II o B a 8 cellule, quindi è di buona qualità, anche se non eccellente. I tassi di impianto di questi embrioni sono elevati, quindi ci sarebbe un'alta probabilità di gravidanza.

È possibile effettuare un trasferimento di embrioni di qualità D?Questi tipi di embrioni hanno una bassa probabilità di essere impiantati, poiché la loro qualità è scarsa. Hanno segni di degenerazione, gravi alterazioni morfologiche come un'elevata frammentazione o vacuolizzazione, o un ritmo di divisione anomalo. Si consiglia di evitare il trasferimento di questo tipo di embrioni, ma se non ci sono altri embrioni di migliore qualità possono essere trasferiti. Anche se le possibilità sono scarse, potrebbero portare a una gravidanza.

Che qualità deve avere un embrione per essere congelato?Non tutti gli embrioni sono in grado di sopravvivere al processo di congelamento e scongelamento. Gli embrioni di migliore qualità hanno tassi di sopravvivenza più elevati, quindi è preferibile congelare embrioni di alta qualità.

Con i trasferimenti di embrioni singoli, le possibilità di successo possono essere inferiori rispetto al trasferimento di più embrioni. Tuttavia, trasferimenti multipli di embrioni possono aumentare la probabilità di una gravidanza di ordine superiore. È importante ricordare che sia la classificazione definitiva che le varie analisi durante lo sviluppo embrionale sono strumenti essenziali per valutare la qualità dello sviluppo e le possibilità di gravidanza. Ad ogni modo, un embrione di tipo A non garantisce il successo e un embrione di tipo D non assicura l’insuccesso del trattamento.

Ovociti "a Fresco" vs. Ovociti Vitrificati: Un Dibattito Aperto

La liberalizzazione della tecnica PMA eterologa in Italia ha rappresentato per molte strutture estere un blocco del flusso di coppie affette da sterilità con conseguenti implicazioni economiche e organizzative. Mentre prima del 2014, data di liberalizzazione di tale attività, non si faceva differenza tra ovociti “a fresco” o vetrificati, oggi soprattutto sui media e sul web, si parla molto di questo argomento con grande confusione.

Diverse prospettive alimentano questo dibattito:

• Strutture estere: Molte strutture estere, organizzate per eseguire procedure eterologhe presso le proprie nazioni, esaltano la differenza parlando di maggiore qualità degli ovociti freschi. Si potrebbe pensare che tali affermazioni siano fatte girare ad arte per non perdere clienti e quindi rispondano a una logica di marketing.
• Ginecologi italiani: Alcuni ginecologi italiani che non hanno centri autorizzati a cui afferire, per continuare l'attività e stimolati dalle ricompense delle strutture estere, indirizzano o propongono alle pazienti di seguirli all'estero.
• Banche straniere: Le banche straniere che hanno scelto di approvvigionare i centri italiani esportando ovociti vetrificati non solo parlano di uguale qualità, ma anzi esaltano le maggiori possibilità in termini di gravidanza della procedura con ovociti vetrificati. Questo perché viene meno l’imprevisto del prelievo (non è detto che da un prelievo ovocitario di una donna giovane possano essere sempre reclutati buoni ovociti o un numero conosciuto) e viene garantita la possibilità a priori di scegliere il numero di ovociti. Anche tali affermazioni potrebbero essere il risultato di una strategia di mercato.
• Centri PMA italiani: I centri PMA italiani, che avendo pochissime donatrici/donatori possono utilizzare solo gameti vetrificati, osservano che non essendo possibile usare gameti maschili a fresco ma solo vitrificati, nessuno parla di differenze tra possibilità di inseminazioni omologhe con spermatozoi a fresco e inseminazioni eterologhe che possono essere eseguite solo con spermatozoi vitrificati. Questo suggerisce una disparità nell'attenzione e nel dibattito tra gameti maschili e femminili in relazione alla vitrificazione.

Il dibattito sulla qualità degli ovociti "a fresco" rispetto a quelli vitrificati è complesso e spesso influenzato da fattori commerciali e logistici. La scelta tra le due opzioni dipende da numerosi aspetti clinici e organizzativi, e la ricerca continua a fornire dati per ottimizzare i protocolli e migliorare i tassi di successo.

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